PAH CALUX® (labo extérieure)

Système biologique exposé

• Lignée cellulaire de rat (H4IIE)

Effets ou modes d'action mis en evidènce

• Le test indique la présence d'hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP) par leur liaison au récepteur des hydrocarbures aryliques (AhR).

Principe du test

• Dans la lignée cellulaire, le gène de la luciférase de luciole est couplé en tant que gène rapporteur à des éléments réactifs à la dioxine (DRE), qui indiquent également la présence d'hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP). Grâce à la méthode de préparation spécifique et à la courte durée d'incubation, ceux-ci ne lient typiquement ici que les HAP.
• Après la liaison des HAP au récepteur cytosolique des hydrocarbures aryliques (AhR), le complexe ligand-récepteur se lie au DRE.
• Les cellules exposées à l'HAP expriment non seulement des protéines associées à la DRE dans des conditions normales, mais aussi la luciférase. En ajoutant le substrat correspondant à la luciférase, de la lumière est émise.
• La quantité de lumière produite est proportionnelle à la quantité de liaison au récepteur spécifique au ligand, qui est comparée au composé de référence correspondant (benzopyrène). La concentration est exprimée en équivalents toxiques (TEQ) ou en équivalents bioanalytiques (BEQ).

Durée

• Durée d'exposition 6 h

Intérêt 

• Le PAH CALUX indique la présence de nombreux hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP).

Normes et références

• Pieterse B, Felzel E, Winter R, van der Burg B, Brouwer A (2013) PAH-CALUX, an
  optimized bioassay for carcinogenic hazard identification of polycyclic aromatic
  hydrocarbons (PAHs) as individual compounds and in complex mixtures. Environ Sci
  Technol, 47, 11651-11659.